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應(yīng)用范圍：細(xì)胞膜熒光染料、細(xì)胞追蹤與長(zhǎng)期示蹤

產(chǎn)品參數(shù) 

分子式：C68H105Cl2N3O 

分子量：1051.5 

CAS 號(hào)：180854-97-1 

Ex/Em: 553/570 nm 

分子結(jié)構(gòu)圖：

貯存條件 -20℃ 避光保存，保質(zhì)期 12 個(gè)月。

產(chǎn)品介紹 

Cell TrackerTM CM-DiI 是 DiI 的衍生物，在水中的溶解性比 DiI 好。它可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為細(xì)胞膜不可滲透的反應(yīng)產(chǎn)物。Cell TrackerTM CM-DiI 染料通過(guò) 幾代培養(yǎng)保留在活細(xì)胞中。Cell TrackerTM CM-DiI 染料至少能穩(wěn)定發(fā)出 72 h 的熒光，具有理想的跟蹤性能，且擁有性質(zhì)穩(wěn)定，工作濃度無(wú)毒性，良好的細(xì)胞保留性等優(yōu)點(diǎn)，在生理 pH 條件下可具有明亮的熒光。此外，Cell TrackerTM CM-DiI 染料的激發(fā)和發(fā)射光譜與 GFP（綠色熒光蛋白）光譜充分分離，可以多種顏色復(fù)用。

Cell TrackerTM CM-DiI 包含一個(gè)溫和的巰基反應(yīng)氯甲基取代基，該取代基通過(guò)與含巰基的肽和蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合，從而可以與含醛基的固定劑交聯(lián)，固定后染色信號(hào)不會(huì)丟失。相比于 DiI 等非共價(jià)結(jié)合的染料，更適合于固定細(xì)胞的染色。

使用方法 

1. 染色液制備

（1）配置 DMSO 或 DMF 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用 DMSO 或 DMF 配置成濃度 1-2 mg/mL 的儲(chǔ)液。 

注：未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。 

（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基， HBSS 或 PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為 1～2 μM 的工作液。 

注：工作液最終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化。建議從推薦濃度的 10 倍范圍內(nèi)開(kāi)始最優(yōu)濃度的摸索。

2. 細(xì)胞染色 

建議將細(xì)胞用工作液在 37℃ 下孵育 5 min 左右，然后 在 4℃再孵育 15 min。在較低的溫度下孵育可減慢胞吞作用從而減少染料標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)囊泡，只標(biāo)記細(xì)胞膜。標(biāo)記完成后，用 PBS 清洗細(xì)胞，并在新鮮培養(yǎng)基中重懸。對(duì)于貼壁細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)時(shí)進(jìn)行標(biāo)記比消化成懸液后標(biāo)記，細(xì)胞生存力更高。以下為可選步驟：

Cell TrackerTM CM-DiI 染色兼容后續(xù)的固定和透化。a. 固定。用 3.7% 多聚甲醛 in PBS，室溫條件下固定 10 min。 b. 透化。用丙酮在-20℃下透化 10 min。

注意事項(xiàng) 

1. 熒光染料存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量避光，以減緩熒光淬滅。 

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。